波多野结衣 黑人丨亚洲va国产日韩欧美精品色婷婷丨国产爽爽久久影院潘金莲丨国产玉足脚交欧美一区二区丨欧美一区二区在线丨日本免费一区二区三区激情视频丨欧美大片免费观看在线观看网站推荐丨一个本道久久综合久久88丨国产精品美女久久久久久2021丨亚洲中文欧美在线视频丨国产亚洲精品麻豆一区二区丨精品xxxxx丨人妻夜夜爽天天爽一区二区丨在线爽丨97在线成人国产在线视频丨久久22丨久久91丨农村少妇野战做爰全过程丨日韩久久免费丨秋霞无码久久久精品丨久久艹中文字幕丨懂色av一区二区三区免费看丨日本人妻巨大乳挤奶水丨中文字幕日本精品一区二区三区丨国产三级在线观看播放

                               大量DNA產物純化試劑盒說明書

MaxiDNA Purification Kit

 大量DNA產物純化試劑盒

   目錄號：  YJ0517

   保   存：  室溫

   組分說明

                                         Cat.No.                  YJ0517

                                         KitSize                     50

                                        BufferPB                   60ml

                                        BufferPS                   15ml

                               BufferPW（concentrate）                10ml

                                        BufferEB                   10ml

                                     SpinColumnDL                   50

                                CollectionTube（2ml）                 50

  產品簡介

      本試劑盒采用新型硅基質膜技術，通過快速簡單的結合-洗滌-洗脫步驟即可從大量的 PCR 產物或酶反   應液（酶切，連接，探針標記等）中純化 50 bp-50 kb 的 DNA 片段，純化過程中可有效去除引物、寡核苷酸、酶等雜質，從而獲得高純度，高濃度，完整性好的 DNA 片段，回收率高達 90%。本試劑盒回收純化的 DNA 可 直接用于測序、連接和轉化、標記、體外轉錄等分子生物學實驗。

注意事項

1.  本試劑盒可無選擇性的回收溶液中所有 DNA 片段，如需選擇性回收特定片段，同時去除其他不同大小片段，請選擇我公司的膠回收試劑盒（YJ0524, 加 YJ2302，YJ0518 或 YJ0526）。

2.  *次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在BufferPW中加入無水乙醇。

3.  使用前請檢查BufferPB是否出現結晶或者沉淀，如有結晶或者沉淀現象，可在37℃水浴幾分鐘，即可恢復澄清。

4． 回收率與初始DNA量和洗脫體積有關。

5． 所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

自備：無水乙醇，離心管

               操作步驟

    1.   估計DNA反應液的體積，加入5倍體積的Buffer PB，充分混勻（如DNA反應體系為100μl，則加 入500μlBufferPB，無需去除石蠟油或礦物油）。

      注意：在加入BufferPB后檢測溶液的pH值，若pH值大于7.5，可向其中加入10-30μl 的3M醋酸鈉（pH5.0），從而將pH值調到5-7。

    2.    柱平衡：向已裝入收集管（CollectionTube）中的吸附柱（SpinColumnDL）中加入200μl Buffer PS，     12,000rpm（~13,400×g）離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

    3.   將步驟1中所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中，室溫放置2分鐘，12,000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

注意：吸附柱容積為700μl，若樣品體積大于700μl可分批加入 。

    4.   向吸附柱中加入650 μl Buffer PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12,000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。

 注意：如果純化的DNA用于鹽敏感實驗（例如平末端連接實驗或直接測序），建議加入BufferPW后靜置2-5分鐘再離心。

   5.  12,000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，以*晾干。

   注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會影響后續的酶促反應（酶切、PCR等）。為確保下游實驗不受殘留乙醇的影響，建議將吸附柱開蓋，置于室溫放置數分鐘，以*晾干吸附材料中殘余的乙醇。

  6.   將吸附柱放到一個新離心管（自備）中，向吸附膜中間位置懸空滴加100 μl Buffer EB（pH 8.5），室溫放置2分鐘。12,000rpm離心1分鐘，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。

      注意：1）洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液，應保證其pH值在7.0-8.5之間（可以用NaOH將水的pH值調到此范圍）。

   2）為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新滴加到吸附柱中，重復步驟6。

   3）洗脫體積不應小于50μl，體積過少會影響回收效率。

    4）如果使用TE洗脫，需要考慮其中含有的EDTA是否會影響后續的酶促反應。

    5）回收大于10kb的DNA片段時，BufferEB應在50℃水浴中預熱，適當延長吸附和洗脫時間，可增加回收效率。