波多野结衣 黑人丨亚洲va国产日韩欧美精品色婷婷丨国产爽爽久久影院潘金莲丨国产玉足脚交欧美一区二区丨欧美一区二区在线丨日本免费一区二区三区激情视频丨欧美大片免费观看在线观看网站推荐丨一个本道久久综合久久88丨国产精品美女久久久久久2021丨亚洲中文欧美在线视频丨国产亚洲精品麻豆一区二区丨精品xxxxx丨人妻夜夜爽天天爽一区二区丨在线爽丨97在线成人国产在线视频丨久久22丨久久91丨农村少妇野战做爰全过程丨日韩久久免费丨秋霞无码久久久精品丨久久艹中文字幕丨懂色av一区二区三区免费看丨日本人妻巨大乳挤奶水丨中文字幕日本精品一区二区三区丨国产三级在线观看播放

酶聯免疫電擴散測定技術

• 酶聯免疫電擴散測定技術的原理

酶聯免疫電擴散是免疫電擴散（Immunoelectrodiffusion,簡稱IED）與免疫酶技術相結合的樣新技術，其原理在于通過免疫電擴散，抗原與該抗原相應的IgG快速形成免疫復合物，接著用酶標記的抗IgG免疫球蛋白與免疫復合物孵育結合，然后用底物顯色。

酶聯免疫電擴散技術增加了免疫電擴散的靈敏度，對分析復雜的抗原反應和不同類型的免疫球蛋白，都有作用。

• 酶聯免疫電擴散測定技術的程序

• 器材與設備

電泳儀（包括電泳槽）；醋酸纖維薄膜（2.5cm×17cm）；微升吸管；大號培養皿等實驗用玻璃器皿。

• 材料與試劑

可溶性抗原溶液；該抗原相應的兔抗血清；HRP標記的抗兔IgG抗體，其中特異性抗體蛋白的濃度為1.25mg/ml;0.1mol/LpH8.2巴比妥緩沖液；0.2%Haemosol溶液；0.1mol/L Ph7.6Tris緩沖液；0.01mol/LpH7.2 PBS;洗滌液(85gNaCI,500ml巴比妥緩沖液，蒸餾水加至1000ml);底物與供氫體溶液（H2O2與DAB－4HC1）。

• 實驗程序

⑴在醋酸纖維薄膜上用軟鉛筆劃好點樣線，每條點樣線距離膜邊3cm，對距11cm,在每條點樣線中間用軟鉛筆劃好點樣點。

⑵在0.1mol/LpH8.2巴比妥緩沖液中浸濕，滴干水，但要保持濕潤。

⑶用微升吸管點樣，一點加抗原3ul(或1ul),另一點加兔抗待測抗原的血清15ul(或5ul),每份點樣的抗原濃度為0.001－50ug.

⑷電泳條件。用濕濾紙搭橋，電泳緩沖液為0.1mol/L pH8.2巴比妥緩沖液，電流強度為1mA/cm,電泳時間為2h,抗原端接負極。

⑸電泳完畢，將薄膜浸入洗滌液30min，去多余的血清蛋白與游離抗原。

⑹將薄膜浸入0.01mol/L pH 7.2PBS中，振蕩洗滌30min,取出薄膜，滴干余水。

⑺將酶標記抗體以1：50稀釋。

⑻用稀釋的酶標記抗體在室溫孵育2h.

⑼在0.2%Haemosol溶液中振蕩洗滌15min.

⑽在Tris緩沖液中振蕩浸洗30min.

⑾在底物溶液中浸1min后，觀察顯色結果