波多野结衣 黑人丨亚洲va国产日韩欧美精品色婷婷丨国产爽爽久久影院潘金莲丨国产玉足脚交欧美一区二区丨欧美一区二区在线丨日本免费一区二区三区激情视频丨欧美大片免费观看在线观看网站推荐丨一个本道久久综合久久88丨国产精品美女久久久久久2021丨亚洲中文欧美在线视频丨国产亚洲精品麻豆一区二区丨精品xxxxx丨人妻夜夜爽天天爽一区二区丨在线爽丨97在线成人国产在线视频丨久久22丨久久91丨农村少妇野战做爰全过程丨日韩久久免费丨秋霞无码久久久精品丨久久艹中文字幕丨懂色av一区二区三区免费看丨日本人妻巨大乳挤奶水丨中文字幕日本精品一区二区三区丨国产三级在线观看播放

樣品去鹽技術(shù)

在免疫酶技術(shù)中，抗原、抗體、酶及酶標(biāo)記抗體（或抗原）在分離與純化過(guò)程中，常常會(huì)碰到去鹽這一實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)。經(jīng)過(guò)去鹽，蛋白質(zhì)溶液中不必要的無(wú)機(jī)鹽分子得以去除，從而使蛋白進(jìn)一步純化與穩(wěn)定。常用的去鹽技術(shù)如下：

1．透析

適用于體積不太大的蛋白質(zhì)溶液，簡(jiǎn)單方便，效果理想但費(fèi)時(shí)。

2.凝膠過(guò)濾

適用于體積中等的蛋白質(zhì)溶液，簡(jiǎn)便快速，效果理想，但去鹽后的蛋白質(zhì)溶液體積增大較多。

3.超濾

適用于體積較大的蛋白質(zhì)溶液，去鹽速度快，同時(shí)具有濃縮作用，但由于膜吸附作用，樣品丟失較多。

4.透析

實(shí)驗(yàn)室常用的去鹽方法是透析法。

在透析法中所使用的透析袋，是一種斗透膜。半透膜具有使小分子或離子透過(guò)，而蛋白質(zhì)分子不能通過(guò)的特性。將蛋白質(zhì)溶液裝入透析袋內(nèi)，浸泡于蒸餾水中，由于膜內(nèi)外可擴(kuò)散離子濃度的差別，使蛋白質(zhì)溶液中的無(wú)機(jī)鹽分子向膜外蒸餾水中擴(kuò)散。如果經(jīng)常更換蒸餾水，則可將蛋白質(zhì)溶液中的鹽類分子全部除去，這就是半透膜的去鹽透析原理。假若膜外不是蒸餾水而是緩沖液，可以經(jīng)過(guò)膜內(nèi)外離子的相互擴(kuò)散，改變蛋白質(zhì)溶液的無(wú)機(jī)鹽成分，這就是半透膜的平衡透析原理。在離子交換層析前經(jīng)常進(jìn)行平衡透析處理。

半透膜透析去鹽過(guò)程如下：

（1）               依據(jù)樣品量的多少，剪取一段半透膜，浸在蒸餾水中一段時(shí)間，然后再用蒸餾水沖洗。

（2）               使用時(shí)，將半透膜一端折疊，封閉使之成底端，并用滴管加入蒸餾水檢查是否漏水。

（3）               在1000－2000ml大燒杯中注滿水，燒杯口上擱置一玻棒。

（4）               倒盡膜內(nèi)蒸餾水，然后加入蛋白質(zhì)樣品液（不能裝得太滿，以免脹裂），用橡皮筋扎牢管的上端，懸掛在玻璃棒中央，放入蒸餾水燒杯中。

（5）               將蒸餾水燒杯置于4℃冰箱中透析2－3天，每天換水3次以上。如果置于磁力攪拌器上攪拌透析，則去鹽效果更好。要經(jīng)常檢查透析袋的扎口是否緊密，以防漏液。

（6）               按不同樣品要求去除不同無(wú)機(jī)鹽離子，可用特定的指示劑測(cè)定zui后透析用過(guò)的蒸餾水中是否還含有這種離子。

5．討論

（1）蛋白質(zhì)樣品的濃度應(yīng)透析后測(cè)定，因?yàn)榻?jīng)過(guò)半透膜透析，膜內(nèi)滲透壓高于膜外，水分子會(huì)進(jìn)入膜內(nèi)，所以在去鹽以后，蛋白質(zhì)溶液體積會(huì)相應(yīng)增大。

（2）有時(shí)會(huì)在透析袋內(nèi)發(fā)生沉淀，一般而言，通過(guò)離心去除并不影響蛋白質(zhì)樣品的性質(zhì)。

 （3）透析袋在生理鹽水中浸洗后，還可繼續(xù)使用。