葡萄糖含量試劑盒說明書（測組織、細菌或細胞）

分光光度法 50 管/48 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物，而且其代謝中間產物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產生葡萄糖。就哺乳動物而言，葡萄糖不僅是大腦神經系統、肌肉、脂肪組織等的唯yi能源，而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關。

測定原理：

葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并產生*；過氧化物酶催化*氧化

4-氨基安替比林偶聯酚，生成有色化合物，在 505 nm 有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽和蒸餾水

試劑的組成和配制：

試劑一：0.5μmol/mL 葡萄糖溶液 10mL×1 瓶，4℃保存；試劑二：液體 25ml×1 瓶，4℃保存；

試劑三：液體 25ml×1 瓶，4℃保存；

葡萄糖提取：

1、組織的處理：按照組織質量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，加入 1mL 蒸餾水），研磨成勻漿，95℃水浴 10 分鐘（蓋緊，防止水分散失），冷卻后， 8000g，25℃離心 10min，取上清液備用。

2、細菌或細胞處理：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10⁴個）：蒸餾水體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 蒸餾水），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3S，間隔 10S，重復 30 次），95℃水浴 10 分鐘（蓋緊，防止水分散失），冷卻后，8000g，25℃離心 10min，取上清液備用。